DH5-Alfa Hücresi - DH5-Alpha Cell - Wikipedia

DH5-Alfa Hücreleri vardır E. coli maksimize etmek için tasarlanmış hücreler dönüşüm verimlilik. Üç mutasyonla tanımlanırlar[1] RecA1, endA1 plazmid yerleştirilmesine yardımcı olan ve lacZΔM15 mavi beyaz tarama. Hücreler yetkili ve sıklıkla kullanılır kalsiyum klorür dönüşümü istenen plazmidi eklemek için. Dört dönüştürme yöntemi ve altı bakteri suşu üzerinde yapılan bir çalışma, en verimli olanın DH5 suşu olduğunu göstermiştir. Hanahan yöntem[2]

Mutasyonlar

  • RecA1 mutasyonu, recA polipeptidinin glisin 160'ını bir aspartik asit kalıntısı ile değiştiren tek nokta mutasyonudur.[3] faaliyetini devre dışı bırakmak için rekombinazlar ve etkisizleştir homolog rekombinasyon.
  • EndA1 mutasyonu, eklenen plazmidi degrade etmesini önlemek için hücre içi bir endonükleazı inaktive eder.

Referanslar

  1. ^ "Gerilim - DH5α". cgsc2.biology.yale.edu. Alındı 2017-05-23.
  2. ^ Chan, Weng-Tat; Verma, Chandra S .; Lane, David P .; Gan, Samuel Ken-En (2013-12-12). "Escherichia coli'nin dönüşümünü etkileyen yöntemlerin ve faktörlerin karşılaştırılması ve optimizasyonu". Biyolojik Bilimler Raporları. 33 (6). doi:10.1042 / BSR20130098. ISSN  0144-8463. PMC  3860579. PMID  24229075.
  3. ^ Bryant, Floyd (9 Kasım 1987). "Tek sarmallı DNA'ya bağımlı ATPaz Aktivitesini Tutan Rekombinaz Eksik Mutant recA Proteininin Oluşturulması" (PDF). Biyolojik Kimya Dergisi.