Tetraploid tamamlama deneyi - Tetraploid complementation assay

tetraploid tamamlama deneyi biyolojide iki hücreden oluşan bir tekniktir memeli embriyolar yeni bir embriyo oluşturmak için birleştirilir.[1] İnşa etmek için kullanılır genetiği değiştirilmiş Organizmalar, belirli mutasyonların embriyonal gelişim üzerindeki sonuçlarını incelemek ve Pluripotent kök hücreler.

Prosedür

Normal memeli somatik hücreler vardır diploid: her biri kromozom (ve dolayısıyla her gen ) çift olarak mevcuttur (Y kromozomunda bulunmayan X kromozomundan gelen genler hariç). Tahlil, bir tetraploid Her kromozomun dört kat bulunduğu hücre. Bu, iki hücreli aşamada bir embriyo alınarak ve iki hücreyi bir elektrik akımı uygulayarak kaynaştırarak yapılır. Ortaya çıkan tetraploid hücre bölünmeye devam edecek ve tüm yavru hücreler de tetraploid olacaktır.

Böyle bir tetraploid embriyo normal olarak Blastosist sahne ve irade aşılama duvarında rahim. Tetraploid hücreler, ekstra embriyonik dokuyu oluşturabilir (plasenta, vb.); ancak, uygun cenin nadiren gelişir.

Tetraploid tamamlama deneyinde, şimdi böyle bir tetraploid embriyo birleştirilir (ya da Morula veya Blastosist sahne) normal diploid ile embriyonik kök hücreleri (ES) farklı bir organizmadan. Embriyo daha sonra normal şekilde gelişecektir; fetüs yalnızca ES hücresinden türetilirken, ekstra embriyonik dokular yalnızca tetraploid hücrelerden türetilir.

Başvurular

  • Yabancı genler veya mutasyonlar, ES hücrelerine oldukça kolay bir şekilde sokulabilir ve bu ES hücreleri daha sonra tetraploid tamamlama deneyi kullanılarak bütün hayvanlara yetiştirilebilir.
  • Tetraploid hücrelere ve / veya ES hücrelerine hedeflenen mutasyonların sokulmasıyla, hangi genlerin fetal gelişim için önemli ve hangilerinin ekstra embriyonik dokuların gelişimi için önemli olduğu incelenebilir.
  • Tetraploid tamamlama deneyi ayrıca test etmek için kullanılır. indüklenmiş pluripotent kök hücreler (farklılaşmış hücrelerden, örneğin deri hücrelerinden yapay olarak üretilen kök hücreler), normal embriyonal kök hücreler kadar etkilidir. Canlı bir hayvan, tetraploid tamamlama analizi kullanılarak indüklenmiş bir pluripotent kök hücreden üretilebiliyorsa, indüklenen kök hücrelerin embriyonal kök hücrelere eşdeğer olduğu kabul edilir. Bu ilk olarak 2009'da gösterildi.[2]

Referanslar

  1. ^ Fare embriyonik kimeraları: memeli gelişimini incelemek için araçlar, Geliştirme 130, 6155-6163 (2003)
  2. ^ Lan Kang, Jianle Wang, Yu Zhang, Zhaohui Kou, Shaorong Gao. 2009. iPS hücreleri, tetraploid blastosist ile tamamlanmış embriyoların tam dönem gelişimini destekleyebilir. Hücre Kök Hücresi. doi:10.1016 / j.stem.2009.07.001 PMID  19631602