Virüs sayacı - Virus counter

Virüs Sayacı 1.3 Software.jpg

virüs sayacı hızlı miktar tayini için bir araçtır virüsler sıvı numunelerde. Uzmanlaşmış akış sitometresi Bu, geleneksel plak tahlilleri için gereken sürenin bir kısmında virüs partiküllerinin konsantrasyonunun doğrudan bir ölçümünü vermek için yüksek hassasiyetli floresan saptamayı kullanır.

Erken gelişme

Virüs sayacı 2001 yılında geliştirildi. Boulder'daki Colorado Üniversitesi.[1] Tek Nanometrik Parçacık Numaralandırıcı (SNaPE) cihazı, solunum virüslerini değerlendirerek tek lekeli nükleik asit agregalarından floresan saptama ilkesine dayanıyordu.[2] Cihazın kantifikasyon sonuçları, beklenen virüs konsantrasyonu ile ilişkilendirildi ve değerler, standart plak titre yöntemleriyle elde edilenlerden önemli ölçüde daha yüksek olacaktır.[3] tipik olarak için kullanılır virüs ölçümü. Ölçülen konsantrasyonlar büyüklük olarak benzerdi nicel PCR sonuçlar, her ikisi de plak titresi değerlerinden önemli ölçüde daha yüksektir.

2004'te virüs sayacı, SNaPE cihazına, özgüllüğü önemli ölçüde artırmak için veri analizini iyileştiren ikinci bir tespit kanalı ekledi.[4] Saptama ilkesi, sıvı bir numune içinde flüoresan boyalarla proteinlerin ve nükleik asitlerin boyanmasına dayanıyordu. Boyanan parçacıklar prob bölgesinden geçerken ve bir lazerle etkileşime girdikçe, emisyonlar tespit edildi ve analiz için kaydedildi. Bu çift kanallı sistem, ortak lokalize protein ve nükleik asitlerin tespiti yoluyla bozulmamış viryonları ölçme konseptini oluşturdu.[5] Elde edilen sonuçlar bakulovirüs Bu çift kanallı virüs sayacı sistemi ile analiz edildiğinde, SNaPE sonuçlarından daha düşük büyüklüktedir, büyüklük bakımından daha benzerdir ve bulaşıcı tahlil sonuçları ile ilişkilidir.[6]

Ticarileştirme

Virüs sayacının ticari bir versiyonu, InDevR. 2012 yılında InDevR, virüs sayacı aracını ViroCyt LCC'ye çevirdi. 15 Ocak 2013 tarihli basın açıklamasında "ViroCyt, InDevR tarafından geliştirilen virüs sayacı teknolojisi için ticari pazarın genişletilmesinden sorumlu olacak" dedi.[7] Sartorius Stedim Biyoteknoloji 2016'da ViroCyt'i 16 milyon dolara satın aldı.[8] Sartorius Stedium'un Virüs Analizi departmanı yeni nesli geliştirdi Virüs Sayacı ticari olarak temin edilebilir.

Başvurular

Enstrüman, yeni nesil "kişisel" in temsilcisidir akış sitometreleri toplam virüs partikül ölçümü için özel olarak tasarlanmıştır. Transmisyon elektron mikroskobu ile belirlenen virüs konsantrasyonuna benzer şekilde, virüs sayacı, toplam virüs partikülü / mL sayısının bir ölçümünü sağlar. Virüs sayacının aşağıdakiler dahil ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere çok çeşitli virüsleri kolayca ölçtüğü başarıyla gösterilmiştir: grip, dang humması, bakulovirüs, solunum sinsitiyal, parainfluenza, kızamıkçık, Sitomegalovirüs, ve herpes simpleks virüs.

Virüsleri hızlı bir şekilde ölçebilme becerisinin şu alanlarda yüksek etkisi vardır:

  • Aşı araştırma, geliştirme ve üretimi
  • Antiviral araştırma
  • Viral vektör araştırma ve protein ifadesi
  • Biyoproses optimizasyonu
  • Viral antijen karakterizasyonu
  • Viral tanı standart karakterizasyonu
  • Viral tabanlı gen tedavisi Araştırma

Reaktifler

Sartorius Stedium, 2016 yılında aldığından beri Virüs Sayacı için çeşitli reaktifler geliştirmiştir. Bu reaktifler arasında zarflı virüsler için düello boyanmış bir reaktif olan Combodye ve spesifik floresan etiketli, yüksek afiniteli reaktifler olan Virotag bulunur.[9]

Referanslar

  1. ^ Ferris, M. M .; Maurer, T. T .; Rowlen, K. L. (2006). "Tek Nanometrik Parçacıkların Algılanması ve Sayılması: Floresan Akış Sitometrisi için Konfokal Optik Tasarım". Bilimsel Aletlerin İncelenmesi. 73 (6): 2404–2410. doi:10.1063/1.1476714.
  2. ^ Ferris, M. M .; McCabe, M. O .; Doan, L. G .; Rowlen, K. L. (2002). "Solunum Virüslerinin Hızlı Numaralandırılması". Analitik Kimya. 74 (8): 2863–2871. doi:10.1021 / ac011183q. PMID  11985317.
  3. ^ Ferris, M. M .; Stoffel, C. L .; Maurer, T. T .; Rowlen, K. L. (2002). "Nanometrik Parçacık Analizi için Transmisyon Elektron Mikroskobu, Akış Sitometrisi ve Epifloresans Mikroskopisinin Kantitatif Karşılaştırması". Analitik Biyokimya. 304 (2): 249–256. doi:10.1006 / abio.2002.5616. PMID  12009703.
  4. ^ Stoffel, C.L .; Rowlen, K. L .; Rowlen, KL (2005). "Kompakt Çift Kanallı Virüs Sayacının Tasarımı ve Karakterizasyonu". Sitometri. 65 (A): 140-147. doi:10.1002 / cyto.a.20145. PMID  15830378.
  5. ^ Stoffel, C.L .; Rowlen, K. L. (2005). "Çift Kanallı Virüs Sayacı için Veri Analizi". Analitik Kimya. 77 (7): 2243–2246. doi:10.1021 / ac048626l. PMID  15801759.
  6. ^ Stoffel, C.L .; Finch, R .; Christensen, K .; Edwards, D .; Rowlen, K.L. (2005). "Çift Kanallı Virüs Sayacı". Amerikan Biyoteknoloji Laboratuvarı. 37 (22): 24–25.
  7. ^ Laura, Rinaldi. "404 Sayfası". InDevR. Alındı 2020-10-02.
  8. ^ "Sartorius ViroCyt'i 16 Milyon Dolara Satın Aldı". GEN - Genetik Mühendisliği ve Biyoteknoloji Haberleri. 2016-07-15. Alındı 2020-10-02.
  9. ^ "Combo Dye® ve ViroTag® Reaktifleri". Sartorius. Alındı 2020-10-03.

Dış bağlantılar