Winogradsky sütunu - Winogradsky column
Winogradsky sütunu çok çeşitli kültürleri oluşturmak için basit bir cihazdır. mikroorganizmalar. 1880'lerde tarafından icat edildi Sergei Winogradsky cihaz, gazete gibi bir karbon kaynağı ile karıştırılmış bir havuz çamuru ve su sütunudur ( selüloz ), kararmış şekerlemeler veya yumurta kabukları ( kalsiyum karbonat ) ve a kükürt alçıtaşı gibi kaynak (kalsiyum sülfat ) veya yumurta sarısı. Kolonun güneş ışığında aylarca inkübe edilmesi, aerobik /anaerobik gradyan ve bir sülfid gradyanı. Bu iki gradyan, farklı mikroorganizmaların büyümesini destekler. Clostridium, Desulfovibrio, Klorobyum, Kromatiyum, Rhodomicrobium, ve Beggiatoa yanı sıra diğer birçok bakteri, siyanobakteri ve alg türü.
Sütun, ilave besin maddelerine bağlı olarak, yukarıda bahsedilen organizmaların çoğalabileceği çeşitli gradyanlar sağlar. Aerobik su fazı ve anaerobik çamur veya toprak fazı böyle bir ayrımdır. Oksijenin sudaki düşük çözünürlüğü nedeniyle, su hızla anoksik çamur ve suyun ara yüzüne doğru. Anaerobik fototroflar hala büyük ölçüde çamur fazında mevcuttur ve sağdaki resimlerde gösterildiği gibi, biyofilm oluşturma ve koloni genişleme kapasitesi hala mevcuttur. Algler ve diğer aerobik fototroflar, sütunların üst yarısının yüzeyi ve suyu boyunca bulunur. Yeşil büyüme genellikle bu organizmalara atfedilir.
İnşaat
Sütun, bileşenlerin kaba bir karışımıdır - kesin ölçümler kritik değildir. Uzun bir bardak (30 cm uzunluğunda,> 5 cm genişliğinde), çubuklar, döküntüler ve hava kabarcıkları çıkarılarak üçte biri havuz çamuru ile doldurulur. ~% 0.25 w / w kalsiyum karbonat ve ~% 0.50 w / w kalsiyum sülfat veya sodyum sülfat ilavesi gerekir (sırasıyla öğütülmüş yumurta kabuğu ve yumurta sarısı bu mineraller bakımından zengindir), biraz rendelenmiş gazete, filtre kağıdı veya saman ( selüloz için). Ek bir anaerobik katman, bu kez takviye edilmemiş çamur, konteyneri üçte ikiye kadar doldurur. Alternatif olarak, bazı prosedürler, ortaya çıkan popülasyonların daha kolay gözlemlenmesini ve örneklenmesini sağlamak için zenginleştirilmiş çökeltinin üzerindeki katman için kum kullanılmasını gerektirir. Bunu, çamuru (veya kumu) doyurmak ve kalan hacmin yarısını kaplamak için havuzdan gelen su izler. Sütun, suyun buharlaşmasını önlemek için sıkıca kapatılır ve güçlü doğal ışıkta birkaç ay inkübe edilir.
Sütun sıkıca kapatıldıktan sonra ilk olarak anaerobik bakteriler gelişecektir. Clostridium spp. Bu anaerobik bakteriler, selülozu bir enerji kaynağı olarak tüketeceklerdir. Bu başladığında CO oluştururlar2 diğer bakteriler tarafından kullanılır ve böylece döngü başlar. Sonunda farklı bakterilerin renk katmanları sütunda görünecektir. Kolonun altında siyah anaerobik H olacaktır2Kükürt azaltıcı bakterilerin hakim olduğu bölge, yukarıdaki katman yeşil kükürt fotosentetik anaerobik bakteriler olacak, daha sonra katman mor olacak, kükürt anaerobik bakteri, ardından başka bir mor anaerobik kükürt içermeyen bakteri sütunu olacak ve üstte bir katman olacaktır. kükürt oksitleyen bakteri olan Cyanobacteria. Bu aerobik bakteri üst tabakası, O üretir2 daha fazla reaksiyon yaratan sütuna geri beslenir.[1]
Winogradsky sütunu, tüm bakteri topluluklarını görmek için mükemmel bir araç olsa da, yoğunlukları veya tek tek bakteri kolonilerini görmesine izin vermez. Ayrıca döngüsünü tamamlaması uzun zaman alır. Ancak çevresel mikrobiyolojideki önemi göz ardı edilmemelidir ve yine de bir numunedeki başlıca bakteri topluluklarını belirlemek için mükemmel bir araçtır.[2]